AVALIAÇÃO IN VITRO DA RESPOSTA INFLAMATÓRIA E CITOTÓXICA DO TITÂNIO REVESTIDO COM QUITOSANA

Abstract

Este estudo in vitro propôs uma pesquisa inovadora na ampliação do conhecimento a respeito da quitosana como biomaterial com potencial para aplicabilidade nas áreas biomédica e odontológica. O trabalho explorou as características topográficas de uma liga de titânio revestida com quitosana, assim como a viabilidade celular, citotoxicidade e resposta inflamatória. Foram utilizadas amostras em forma de discos (Ø13 x 2 mm) compostos por titânio comercialmente puro maquinado e cada experimento contou com um “n” amostral igual a 4. Os discos passaram por caracterização através da técnica layerblayer (LbL) sendo depositadas as 20 camadas de quitosana e avaliados pela microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia de força atômica (MFA). A viabilidade da linhagem celular VERO, exposta a liga de titânio foi avaliada pelo ensaio de resazurina. A citotoxicidade dos discos avaliada pela citometria de fluxo e a resposta inflamatória analisada através da concentração de citocinas IFN-γ, IL1-β, IL-6, IL-10, TNF-α por meio do ensaio imunoenzimático ELISA. Os dados da rugosidade e resposta inflamatória foram submetidos à análise de variância (ANOVA), seguido pelo pós teste de Tukey. Para análise de viabilidade e citotoxicidade realizou-se testes de Kruskal-Wallis e pós teste de Dunn’s. Para todos os testes estatísticos foram considerados significativas as diferenças com p < 0,05. A caracterização topográfica do material revestido apresentou uma homogeneização na distribuição de quitosana. As células VERO CCL-81 mostraram viáveis quando expostas a superfície revestida com quitosana. As analises de citotoxicidade mostraram que o material revestido com quitosana apresentou baixa indução de apoptose quando comparado ao Ti não revestido, tornando-se constatado através dos resultados da avaliação da resposta inflamatória frente às citocinas que evidenciaram dados semelhantes ao do controle celular. Através de testes in vitro, o Ti com quitosana mostrou baixa indução de células apoptóticas, redução da citotoxicidade e não induziu resposta inflamatória mediante aos ensaios de liberação de citocinas.